细胞老化是什么?如何处理?
作者:南京森贝伽生物科技有限公司
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<p><strong>衰老or老化</strong></p>
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<p>细胞衰老是指稳定细胞周期停滞的状态,在这种状态下增殖细胞会对促生长刺激产生耐受,通常由 DNA 损伤所引起。Leonard Hayflick 首先描述了细胞衰老,他观察到人类胎儿成纤维细胞最终会停止分裂,但在长时间培养后仍然具有活力和代谢活性。现在普遍认为,除了具有干细胞样特性的细胞类型外,只有转化的恶性细胞会无限复制,而非转化细胞则不会。除了在体外受控条件下发育的胚胎干细胞或诱导多能干细胞,此类细胞还包括内源性生殖干细胞和成体干细胞。衰老细胞与静息细胞和终末分化细胞均不同,其中静息细胞能够重新进入细胞周期。</p>
<p>衰老细胞的特征是形态学和代谢变化、染色质重构、基因表达改变以及出现一种称为衰老相关分泌表型 (SASP) 的促炎症表型。衰老的生物学作用复杂,衰老细胞的保护作用和有害作用均已有描述,主要取决于生理环境。例如,尽管衰老可能作为避免受损细胞恶性转化的机制进化而来,但衰老的发生可能会导致许多年龄相关病变,包括癌症、组织退化和炎症性疾病。</p>
<p>老化和细胞衰老这两个术语不能互换使用。老化是随时间推移的进行性衰退,而衰老在整个生命周期中都可发生,包括胚胎发生期间。衰老细胞的数量随着年龄增大而增加,但衰老还在发育以及伤口愈合中发挥重要作用。</p>
<p> </p>
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<p><strong>2</strong></p>
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<p><strong>老化是什么</strong></p>
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<p>老化是生命发展的必然,任何细胞从诞生之时起,老化过程就开始了。老化的细胞结构蛋白、酶蛋白和受体蛋白合成减少,摄取营养和修复染色体损伤的能力均下降,表现为细胞和胞核变形,线粒体、高尔基体扭曲或呈囊泡状,胞质色素沉着,细胞体积缩小,由此导致器官重量减轻,间质增生硬化,功能代谢降低,储备功能不足。</p>
<p>肉眼显微镜下观察细胞主要镜下特征:</p>
<p>1、细胞内部会出现空泡(可能是凋亡小体),也可能会出现黑点,大多沿细胞周边排布,内部中间也可能会显现一些,但相对周边为少。</p>
<p>2、老化以后的细胞会出现形态的改变,立体感会慢慢消失,开始成扁平状,细胞与细胞之间的间隔减小或混在一起,细胞不再是梭形,而会成为各种不规则形状。</p>
<p>3、细胞折光性变差,镜下可见细胞“变薄”,做转染实验时,细胞死亡率会较高。但培养液不会发生迅速变黄的现象,仍清亮。</p>
<p>4、细胞的贴壁性减弱,开始有细胞漂浮于培养液中。</p>
<p>5、老化的细胞,表面分泌物会增多,细胞表面的纯净度越来越低。</p>
<p>6、分裂的细胞数量明显地减少同时细胞的增殖速度也会大大下降。</p>
<p>7、细胞开始长角分化。</p>
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<p><strong>3</strong></p>
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<p><strong>老化的原因</strong></p>
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<p>1、氧化应激:由内在或外在因素引起的氧化压力会加速细胞老化。</p>
<p>2、端粒缩短:端粒是染色体末端的保护结构,其缩短会导致细胞分裂次数有限,从而引发细胞老化。</p>
<p>3、细胞自噬功能降低:细胞自噬是细胞内部清理和修复机制的一部分,功能降低会导致细胞老化。</p>
<p>4、营养不足:培养液中的营养成分不足也会导致细胞老化。</p>
<p>5、传代次数过多:在体外培养过程中,细胞传代次数过多或时间过长也会引起细胞老化。</p>
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<p><strong>1</strong></p>
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<p><strong>如何预防细胞老化</strong></p>
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<p>1、不要等细胞长得太满才传代。细胞太密会导致细胞状态下降,产生细胞接触性抑制。一般密度到80-90%左右就可以传代了。</p>
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<p>2、细胞不要消化过度。采用胰蛋白酶消化细胞,会造成细胞表面一定程度的细胞损伤。一定要注意选用的胰酶品牌,使用的胰酶量,绝大多数细胞使用0.25胰酶含edta这款消化液,t25瓶1ml,培养箱消化1min即可拿出来在显微镜下看细胞脱落情况。</p>
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<p>3、最重要的是使用优质的血清和培养基:干细胞对培养基中的内毒素非常敏感。除了要留意基础培养基的内毒素外,也要留意血清的内毒素。如果血清中内毒素≥3EU/ml时,干细胞很容易老化或死亡,导致细胞“亚健康”状态,导致实验受到影响。很多使用者,在血清在试用前,就会通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。</p>
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<p>4、在开始养细胞并传代时,也要特别注意冻存细胞,以保持细胞有种子库存在,可以有效避免细胞损伤。</p>
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