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脑脊液样本该如何收集与保存！

作者：上海远慕生物科技有限公司 2015-11-30T00:00 (访问量:11205)

脑脊液样本该如何收集与保存
如今，ELISA实验样本已不仅仅局限于血清、血浆组织了，更多时候广大科研者开始提取脑脊液作为研究对象。那么，脑脊液该如何提取跟保存呢？如果您心中也带着这个疑惑，请跟随我司技术部王老师的脚步一起获知其中的奥秘。

脑脊液的采集
1.狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法：动物轻度麻醉后，侧卧位固定，使头部及尾部向腰部尽量弯曲，剪去第七腰椎周围的被毛。消毒后操作者在动物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮肤，右手持腰穿刺针垂直刺入，当有落空感及动物的后肢跳动时，表明针已达椎管内（蛛网膜下腔），抽去针芯,即见脑脊液流出。如果无脑脊液流出，可能是没有刺破蛛网膜。轻轻调节进针方向及角度，如果脑脊液流的太快，插入针芯稍加阻塞，以免导致颅内压突然下降而形成脑疝。

2.大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法
在大鼠麻醉后，头部固定于定向仪上。头颈部剪毛、消毒，用手术刀沿纵轴切一纵行切口（约2cm）用剪刀钝性分离颈部背侧肌肉。为避免出血，最深层附着在骨上的肌肉用手术刀背刮开，暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔进针直接抽取脑脊液。抽取完毕逢好外层肌肉、皮肤。刀口处可撒些磺胺药粉，防止感染。采完脑脊液后，应注入等量的消毒生理盐水，以保持原来脑脊髓腔的压力。

脑脊液的保存条件
1.如果实验要求只是测定其中的蛋白含量的话，采集脑脊液后，离心1500g（左右）/10min（左右）。然后收集上清，分装保存于液氮[最佳选择]或-80度即可。（如果短时间内就使用，-20度也可以，但能保存于-80度）。整个过程是冰上操作。

2.保存过程中，避免反复冻溶，防止蛋白降解。

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