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上样缓冲溶液

    上样缓冲溶液也叫加样缓冲溶液,是在电泳分离过程中进行加样的缓冲溶液。其作用是使欲分离的样品上色,能够在电泳时形成肉眼可见的指示带,可以方便的辨别电泳的速度和位置,同时上样缓冲溶液可增加样品密度,以确保样品均匀进入样品孔内,加样方便迅速。

     所以加样缓冲溶液的主要成份有染料、SDS、DTT、甘油和缓冲盐溶液。常用染料有:溴酚蓝(BPB)、二甲苯菁FF(Xylene Cyanol)、橙黄G(Orange(G))、柠檬黄(Tartrazine)等,染料主要做样品染色；SDS的作用是与样品结合形成带有大量负电荷的复合物,使样品本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种样品本身的电荷差异。另外,SDS还可以断开样品分子内和分子间的氢键,破坏样品分子二级和三级结构。DTT是强还原剂,全名为Dithiothreitol(二硫代苏糖醇),可以断开样品中的二硫键,破坏样品的四级结构,进一步消除样品之间的差异,使最后无电荷、无结构差异的样品的电泳速度只与分子量大小有关,使样品得到彻底分离。甘油、蔗糖、Ficoll等,都是比水重的化学药品,能帮助样品很好沉入孔中。

    上样缓冲溶液用量一般是样品量的1/3-1/4。如果样品浓度太大时,一定经过稀释后再加入上样缓冲溶液。上样缓冲溶液还分为还原性上样缓冲溶液和非还原性上样缓冲溶液,如被分离样品中含有二硫键,那必须使用还原性上样缓冲溶液；如被分离样品中根本不含有二硫键就没有必要使用还原性上样缓冲溶液。含有DTT或巯基乙酸的称还原性缓冲溶液；不含有还原剂DTT或巯基乙酸的上样溶液,称为非还原性缓冲溶液。

    还原性上样缓冲溶液非常不稳定,必须在超低温储存。为了方便储存,我公司生产的上样缓冲溶液均为非还原性,使用时临时加入微量固体还原剂,即可确保了还原剂的稳定,同时也方便、快速。还原剂客户可自备,也可从我公司购买。

    经过多年来的潜心研究,可提供给用户国产的、有价格优势的各种上样缓冲溶液,可轻松实现DNA、蛋白质等样品的上样和示踪。