BAL 31核酸酶

产品及特点

BAL 31 Nuclease（BAL 31核酸酶）是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA，没有单链时也作用于双链DNA，表现出从DNA两端同时降解的5′→3′及3′→5′的外切酶活性（Trimming活性），最终产物为5′-P单核苷酸。 该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链 DNA单链区和双链 RNA 的单链区进行切割。其工作原理图如下：

本产品具有下列特点：

1. 从两端逐步对双链 DNA 进行切割。

2. EGTA 使本酶失活。

3. 限制性酶切图谱的构建。

备注

1. 单链Endonuclease活性在反应温度从30℃降到20℃时，大约下降到1/10左右，而双链Exonuclease活性大约残留1/3左右。

2. Endonuclease活性不受盐浓度影响，但Exonuclease则是盐度越高活性低。

3. Trimming 活性的最适盐浓度在200 mM NaCl左右，若低于此浓度有时表现Nicking活性。

4. 分解活性对碱基的依存性较高，由于GC rich领域不易被分解，在酶切时，需选择末端限制酶位点。

5. 反应中因各种酶活性的反应分配（Distributive）关系，对酶浓度有较大的依存，所以对稀释不表现线性关系。因此当酶反应速度过时，应降低反应温度。

6. 本酶需要Ca2+的存在，通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时，该酶对于单链DNA表现出最大活性。相反对于双链DNA，其活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时，有时会发生随机分解。因此，建议在盐浓度200～600 mM的范围内进行反应。

7. 通过本酶产生的末端的平滑率只有10%左右，为了提高连接效率，建议通过T4DNA Polymerase进行修复。