端粒酶活性检测试剂盒（50T）
产品名称： 端粒酶活性检测试剂盒（50T）
英文名称： Telomerase activity assay kit
产品编号：
产品价格： 12500
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品牌商标： null
更新时间： null
使用范围： null
上海松茸生物科技有限公司
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端粒酶 (Telomerase ) 是一种酶促核糖核蛋白复合物。其催化亚基 (TERT) 具有逆转录酶的特
性，TERT被认为是端粒酶活性表达的关键组分，其编码的mRNA水平与端粒酶活性一致，与端粒酶的
活化程度密切相关。因此，对端粒酶催化亚基的检测可以间接反映样本中端粒酶活性。
本 产品试剂盒采用双色荧光qPCR (TaqMan探针法) 检测端粒酶催化亚基TERT基因和内参基因GAPDH 。通过提取细胞RNA ，利用特异性逆转录引物进行逆转录反应， 以cDNA为模板在单管中利用多重荧光定量PCR进行扩增反应 (双重探针：FAM 、Cy5) 。选用293T细胞为阳性对照以及MRC-5细胞为阴性对照，判断样本中是否有TERT基因表达。该试剂盒具有以下特点：
1. 灵敏：双色探针，灵敏度高。
2. 稳定：全程闭管操作，无交叉污染。
3. 可靠：含内参基因，避免假阴性。
4. 方便：操作简单，无需电泳步骤。
5. 定量： 以CT值判断，可定量检测。
1. 检测所用试剂
RNA抽提试剂盒：FineProtect通用型RNA提取试剂盒(Code No.203，济凡生物科技(常州)有限公司，中国)
RNA逆转录试剂盒： RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(00820611，Thermo scientific，Germany)
双色荧光TERT基因检测试剂盒：自研
阳性对照：293T细胞
阴性对照：MRC-5细胞（正常的人胚肺细胞）
2. 检测所用主要仪器
荧光定量PCR： Real Time PCR System(SLAN-96S，中国)
RNA质控：Nanodrop 2000C Spectrophotometer(Thermo scientific，Germany）
判读标准
1. 阳性对照4倍稀释后TERT基因Ct值在25±3，内参基因Ct值在17±3，8倍稀释后TERT基因Ct值在26±3，内参基因Ct值在18±3，对照品
端粒酶活性为阳性，显示实验稳定检出阳性样本的TERT基因表达量。
2. 阴性对照经4倍、8倍梯度稀释后，TERT基因Ct值≥35（或检测不到），内参基因Ct值仍在18±3之间，阴性对照品端粒酶活性为阴性。