INVSC1 酵母感受态细胞

保存条件：-80℃。

1.产品简介：

INVSc1菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母，pYES2质粒 与INVSc1酵母配套使用，激活pYES2质粒的GAL1启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1为合子型，可直接通过 PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛 选标志为URA，可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特 殊工艺制作，pYES2质粒检测转化效率>10⁴ cfu/μg DNA

基因型：MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52

2.使用说明：

1).取一支无菌的1.5ml EP管，依次加入预冷的目的质粒1-3μg, Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴，重复一次)，100μl冰.上融化的INVSC1感受态细胞，PEG/LiAc 500ul， 轻轻翻转混匀6-8次;

2).30℃ 水浴30min，每10min轻轻翻转混匀6-8次;

3).每支加入20ul的二甲基亚砜; (用于提高转化效率，可不做)

4).42℃水浴15min，每5min轻轻翻转混匀6- 8次;

5).12000rpm瞬时离心弃上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃复苏1h; (用于提高转化效率， 可不做)

6).12000rpm瞬时离心弃上清，用100ul 0.9% NaCl 重悬，涂板,30℃培养48 - 96h。

3.注意事项：

1).感受态细胞最好在冰上融化,。

2). PEG溶液在低温环境下会析出，请于常温下完全溶解后使用。

3).INVSC1酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃;高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。

*本试剂仅供实验室研究使用